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丹参中脂溶性成分的提取方法的探究

丹参中脂溶性成分的提取方法的探究

分类:医药卫生论文   更新:2015/3/22   阅读:   作者:佚名   来源:本站原创

丹参中脂溶性成分的提取方法的探究

    丹参中脂溶性成分的提取方法的探讨
    【摘要】目的 丹参中脂溶性成分丹参酮ⅡA是丹参制剂中重要的活性成分,也是成品的主要检测指标,通过对丹参酮ⅡA提取方法的研究,对丹参制剂提取工艺的优化具有重要的现实意义。方法 根据当前丹参制剂的生产工艺出发,在提取时间、溶媒倍数、提取温度、溶媒浓度等方面进行筛选试验,利用高效液相色谱法进行含量测定。结果 丹参的最佳提取重要条件为,4倍量90%的乙醇,70℃温浸1.5小时,通过实验证明采用以上所述的丹参提取方法,干燥过程同样采用低温减压浓缩的丹参提取物中丹参酮ⅡA转移率超过50%。结论 本方法简便,快速,利于有效成分保留,适用于丹参中脂溶性成分的提取,对于丹参制剂的生产工艺优化有指导意义。
    【关键词】丹参酮ⅡA 提取方法 工艺优化
    丹参为唇形科鼠尾草,属多年生草本植物丹参的干燥根,其活性成分可分为脂溶性成分和水溶性酚酸成分,前者主要包括丹参酮ⅡA、丹参酮I和隐丹参酮等;后者主要包括丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、丹酚酸B和丹酚酸C等[1]。本文以脂溶性成分丹参酮ⅡA为指标对提取方法进行研究。丹参酮ⅡA在临床上具有很好的药理活性,有抗凝血、促纤溶作用[2]。我们以丹参酮ⅡA这一活性成分为指标,从提取时间、提取溶媒倍数、提取温度、提取溶媒浓度等方面进行试验,以筛选提取条件,为提取工艺优化奠定基础。
    1 药品与试剂
    丹参(蓟县野生药材),丹参酮ⅡA对照品(购于中国药品生物制品检定所),甲醇(分析纯)、乙醇(药用级)、蒸馏水。
    2 方法
    2.1色谱条件的确定 高效液相色谱仪:SP-8100。色谱柱:YMC C18分析柱(4.6mm×150mm)。流动相:甲醇-水(75∶25)。检测波长:270nm。流速:1ml/min。
    2.2对照品溶液的制备 精密称取丹参酮ⅡA对照品,用分析甲醇配制成浓度为0.0502mg/ml的对照品溶液。
    3 试验及结果
    3.1试验用丹参药材中丹参酮ⅡA的含量测定 取丹参粉末(过三号筛)0.3g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加甲醇50ml,密塞,称定重量,加热回流1小时,放冷,密塞,再称定重量,用甲醇补足重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。测得的丹参药材中丹参酮ⅡA含量为0.53%。
    3.2提取时间对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材,每份50g,各加乙醇溶液200ml,在水浴中回流(微沸)不同的时间,滤过,滤液置200ml容量瓶中,放至室温,用乙醇溶液加至刻度,混匀,取少量上述溶液离心,取上清液作为供试品溶液。按上述检测方法进行含量测定,通过实验可以看到提取丹参的时间在0.5小时至1.5小时,所得到的提取液中丹参酮ⅡA的含量没有显着变化,当提取时间延长至2.0小时时,提取液中丹参酮的含量反而下降,所以提取时间应不超过1.5小时。 3.3溶媒倍数对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材,每份50g,分别加入不同量的乙醇溶液,水浴回流1.5小时(微沸),滤过,滤液置不同量的容量瓶中,放至室温,用乙醇溶液定容,混匀,取少量上述溶液离心,取上清液作为供试品溶液,按上检测方法进行含量测定,提取所用溶媒倍数超过4倍时,提取液中丹参酮ⅡA的含量并没有明显的提高,从经济上考虑,选择4倍量是比较合理的。
    3.4提取时温度对丹参酮ⅡA含量的影响 取六份丹参药材,每份50g,各加乙醇溶液200ml,分别在不同温度的水浴中提取1.5小时,滤过,滤液置200ml容量瓶中放至室温,用乙醇溶液定容,混匀,取少量上述溶液离心,取上清液作为供试品溶液,按上述检测方法进行含量测定,提取温度试验表明,提取温度在低于70℃时,提取液中丹参酮的含量随温度的升高而增加,超过70℃时,提取液中丹参酮ⅡA的含量随温度的升高反而下降。
    3.5醇浓度对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材,每份50g,加入不同浓度的乙醇溶液各200ml,在70度水浴中温浸1.5小时,滤过,滤液置200ml容量瓶中放至室温,用相应浓度的乙醇溶液定容,混匀,取少量上述溶液离心,取上清液作为供试品溶液,按上述检测方法进行含量测定,提取时溶媒浓度越高,提取液中丹参酮含量也越高,但90%的醇提液与95%的醇提液中丹参酮ⅡA含量没有大的变化,所以提取时可以采用90%的醇代替95%的醇。
    4 讨论
    4.1由以上结论可见,丹参的最佳提取条件为:4倍量90%的乙醇,70℃温浸1.5小时。通过实验证明采用以上所述的丹参提取方法,干燥过程同样采用低温减压干燥得到的丹参提取物中丹参酮ⅡA有50%以上能被保留下来。
    4.2关于丹参药材我们也做了多品种考察,在此不做详述,但比较中我们认为,天津蓟县和周边地区所产野丹参中含量最佳,故以其为研究对象。

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